改訂マウス・ラット実験ノート

実験医学別冊　Experimental Medicine

改訂マウス・ラット実験ノートはじめての取り扱い、倫理・法的規制から、飼育法・投与・麻酔・解剖、分子生物学的手法とゲノム編集まで				◆　出版社　◆　羊土社〒101-0052 東京都千代田区神田小川町2-5-1 TEL 03-5282-1211 FAX 03-5282-1212 URL https://www.yodosha.co.jp/

中釜　斉／監，北田一博，庫本高志，真下知士／編

■　改訂版の発刊にあたり

【中釜　斉】

■　初版　序

【中釜　斉】

■　第1章　マウス・ラットを用いた実験をはじめるにあたって

【北田一博】

I．マウス・ラットを用いた実験

I-1　マウス・ラットを用いた実験とは

I-2　なぜ，マウス・ラットなのか

I-3　マウス・ラットを用いた実験の種類と流れ

II．動物実験で結果を出すためのノウハウ

II-1　事前に実験計画を練り抜く

II-2　マウス・ラットの都合に合わせる

II-3　動物実験手技を洗練させる

III．マウス・ラット実験の倫理的・法的規制

III-1　マウス・ラット実験の倫理的な考え方

III-2　マウス・ラット実験の法的規制

IV．種・系統の選択法

IV-1　マウスかラットか

IV-2　マウス系統の選択

IV-3　ラット系統の選択

V．マウス・ラットの入手方法

V-1　業者から購入可能なもの

V-2　国内のリソースセンターから分与してもらうもの

V-3　国外のリソースセンターから分与してもらうもの

V-4　研究者に分与してもらうもの

■　第2章　基礎知識・取り扱い方

【今井俊夫，落合雅子】

I．飼育・実験に必要な基礎知識

I-1　生物学的特性

I-2　導入前の基礎知識

I-3　導入時の基礎知識

II．保定法

II-1　用手的な保定

II-2　器具を用いる保定法

II-3　逸走した場合の対応

III．個体識別（マーキング）法

III-1　マーキング（耳介）

III-2　マーキング（被毛）

III-3　マーキング（尾）

III-4　マーキングに使用する器具と麻酔の利用

■　第3章　研究のための飼育・管理の仕方

I．飼育・管理と観察の仕方
【庫本高志】

I-1　動物実験に影響を与える因子

I-2　SPF領域（バリア領域）への入退室と観察の仕方

II．ケージ交換の基本とコツ
【庫本高志】

II-1　注意点と手順

III．安楽死法
【庫本高志】

III-1　心構えと安楽死法の種類

III-2　麻酔下での頸椎脱臼法

III-3　炭酸ガスによる窒息

IV．死体処理の仕方
【庫本高志】

IV-1　心構えと処理の実際

V．胚や精子の超低温保存法
【滝澤明子，小林俊寛，吉見一人】

V-1　マウス・ラットの2細胞期胚の保存方法

V-2　マウス精子凍結保存方法

VI．体外受精と胚移植
【小林俊寛，吉見一人】

VI-1　マウス・ラットの体外受精方法

VI-2　マウス・ラットの胚移植方法

■　第4章　研究のための繁殖・交配

【綾部信哉，水野沙織，吉木　淳】

I．繁殖・交配の基礎知識と方法

I-1　動物を導入する前に

I-2　マウス・ラットの性周期と繁殖

II．系統維持に必要な知識と交配方法

II-1　代表的な系統の種類と交配方法

II-2　系統の維持・交配に有用なその他の方法

III．系統の維持の仕方と研究のための繁殖計画

III-1　系統維持のための個体管理法

III-2　研究のための繁殖計画

IV．ジェノタイピング（遺伝子型の判定法）

IV-1　DNAの抽出（マウス・ラット組織からのゲノムDNA精製）

IV-2　PCR反応

IV-3　アガロースゲルの作製

IV-4　電気泳動と染色

IV-5　ジェノタイピングの実例と注意点

V．微生物モニタリング

V-1　微生物モニタリングの意義

V-2　感染症の成立過程

V-3　微生物モニタリングの設計

V-4　検査法と検体

V-5　感染症が疑われる個体を発見したら

V-6　糞便検体の採取

■　第5章　基本的な実験手法

I．投与法
【平川公昭】

I-1　腹腔内投与法

I-2　静脈内投与法

I-3　経口投与法

I-4　皮下投与法

I-5　筋肉内投与法

II．採血法
【平川公昭】

II-1　マウス・ラットの腹大動脈採血（全採血）

II-2　マウス・ラットの尾静脈採血（一部採血）

II-3　マウス・ラットの外頸静脈採血（一部採血）

III．麻酔法
【平川公昭】

III-1　全身麻酔の種類

III-2　腹腔内投与による全身麻酔

III-3　吸入による全身麻酔

IV．解剖法
【平川公昭】

V．分子生物学的手法
【庫本高志】

V-1　ゲノムDNAの精製

V-2　トータルRNAの抽出

V-3　タンパク質の抽出

■　第6章　研究への応用・手法の紹介

I．マウス・ラットでできること

I-1　実験をはじめる前に
【北田一博】

I-2　初代培養
【庫本高志】

I-3　in vivoイメージング
【庫本高志】

I-4　移植実験
【石田紗恵子】

I-5　発がん実験
【庫本高志】

I-6　抗体作製法
【北田一博】

I-7　行動解析
【石田紗恵子】

II．トランスジェニックマウス（ラット）・遺伝子ターゲティングマウス作出
【後藤元人，高橋利一】

II-1　トランスジェニックマウス（ラット）の作出

II-2　遺伝子ターゲティングマウスの作出

II-3　トランスジェニックマウス，遺伝子ターゲティングマウスの使用上の注意

III．ゲノム編集を用いた遺伝子改変マウス・ラットの作製
【吉見一人，真下知士】

III-1　ゲノム編集の原理

III-2　受精卵でのゲノム編集

III-3　Cas9およびgRNAの入手，設計

III-4　ノックイン用ドナーDNAの設計，調製

III-5　受精卵への導入法

III-6　遺伝子改変動物作製支援

IV．便利なデータベース紹介とその使用法
【吉見一人，真下知士】

IV-1　マウス系統を検索する

IV-2　ラット系統を検索する

IV-3　マウス・ラットの遺伝子情報を調べる

V．便利な受託機関紹介とその使用法
【吉見一人，真下知士】

V-1　マウス・ラットを胚／精子で凍結保存する

V-2　マウス・ラットの微生物検査（モニタリング）を依頼する

V-3　ウスの特性解析を依頼する

■　付録（1）コピーして使える便利な付録

■　付録（2）マウス・ラット実験の便利な資料集

【渡邊歩美，庫本高志】

■　付録（3）トラブルシューティング

【北田一博】

■　索引